如何挑選適合實驗的ELISA試劑盒之實驗類型

ELISA是一種廣泛應(yīng)用于大分子蛋白和小分子激素定量檢測的免疫診斷技術(shù)。ELISA實驗操作雖然不算復(fù)雜，但也有許多需要注意的事項。各個環(huán)節(jié)稍有不慎，就可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生影響。

ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個共同特點，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cellELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPoT是兩種特殊的類型，In-cellELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPoT有點像蛋白印跡Westexnb1ot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點。此外，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是38孔板進(jìn)行ELISA實驗。

通常人們使用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA實驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是ui佳選擇，例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著，又或者抗體只有一個抗體結(jié)合位點。在上述情況下，競爭性ELISA就更為適用，這種方法是采用帶標(biāo)記的純化抗原與樣本中無標(biāo)記的抗原進(jìn)行競爭，以結(jié)合捕獲抗體。

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