ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些？

ELISA實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記，其中，結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過(guò)洗板除去非結(jié)合物，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，此時(shí)，能固定下來(lái)的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過(guò)加入與酶反應(yīng)的底物后顯色，根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量，進(jìn)行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。

那么ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些？

    1.在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致呈現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

    2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)刻和溫度。請(qǐng)注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，di一個(gè)孔與一個(gè)孔加樣之間的時(shí)刻距離假如太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時(shí)刻，然后明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。

    3.試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。  

    4.濃洗滌液會(huì)有鹽分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

    5.剛敞開(kāi)的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

    6.一切的樣品都應(yīng)管理好，依照規(guī)則的程序處理樣品和檢測(cè)設(shè)備。